CCAR2 Knockout HGC-27 Cell Pool
Product classification
Welcome to consult Elem's high-throughput CRISPR service.
Contact us to orderCCAR2 Knockout HGC-27 Cell Pool
Product ID：
Market price
Stock surplus
Antibody custom service consulting
隐藏域元素占位
- 产品描述
- 细胞复苏
- 细胞传代
- 细胞冻存
- 抗体验证结果
-
- Brand: ELEM粒曼
- Commodity name: CCAR2 Knockout HGC-27 Cell Pool
- Gene Symbol: CCAR2 DBC1 KIAA1967
- Ensembl ID: ENSG00000158941
- Uniprot ID: Q8N163
- 宿主细胞 / 类型: HGC-27/人胃癌细胞
- NCBI Gene ID: 57805
- 规格: 1×10^6 cells/ 冻存管
- 生长培养基: RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 筛选标记: N/A
- 生长特性: 贴壁细胞，上皮细胞样
- 培养条件: 37℃,5% CO2 的培养箱，1/2 到 1/4传代
- 倍增时间: ~17 hours
- 参考换液频率: 2~3次/周
- 支原体检测结果: 阴性
- 敲除效率（Sanger测序）: >70%
- 蛋白质组验证结果: N/A
- 抗体货号: 添加中
- 目标基因介绍: Core component of the DBIRD complex, a multiprotein complex that acts at the interface between core mRNP particles and RNA polymerase II (RNAPII) and integrates transcript elongation with the regulation of alternative splicing: the DBIRD complex affects local transcript elongation rates and alternative splicing of a large set of exons embedded in (A + T)-rich DNA regions (PubMed:22446626). Inhibits SIRT1 deacetylase activity leading to increasing levels of p53/TP53 acetylation and p53-mediated apoptosis (PubMed:18235501, PubMed:18235502, PubMed:23352644). Inhibits SUV39H1 methyltransferase activity (PubMed:19218236). Mediates ligand-dependent transcriptional activation by nuclear hormone receptors (PubMed:19131338). Plays a critical role in maintaining genomic stability and cellular integrity following UV-induced genotoxic stress (PubMed:23398316). Regulates the circadian expression of the core clock components NR1D1 and ARNTL/BMAL1 (PubMed:23398316). Enhances the transcriptional repressor activity of NR1D1 through stabilization of NR1D1 protein levels by preventing its ubiquitination and subsequent degradation (PubMed:23398316). Represses the ligand-dependent transcriptional activation function of ESR2 (PubMed:20074560). Acts as a regulator of PCK1 expression and gluconeogenesis by a mechanism that involves, at least in part, both NR1D1 and SIRT1 (PubMed:24415752). Negatively regulates the deacetylase activity of HDAC3 and can alter its subcellular localization (PubMed:21030595). Positively regulates the beta-catenin pathway (canonical Wnt signaling pathway) and is required for MCC-mediated repression of the beta-catenin pathway (PubMed:24824780). Represses ligand-dependent transcriptional activation function of NR1H2 and NR1H3 and inhibits the interaction of SIRT1 with NR1H3 (PubMed:25661920). Plays an important role in tumor suppression through p53/TP53 regulation; stabilizes p53/TP53 by affecting its interaction with ubiquitin ligase MDM2 (PubMed:25732823). Represses the transcriptional activator activity of BRCA1 (PubMed:20160719). Inhibits SIRT1 in a CHEK2 and PSEM3-dependent manner and inhibits the activity of CHEK2 in vitro (PubMed:25361978).
- 细胞开发路径: 采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell Pool；Sanger 测序结果显示KO Cell Pool敲除效率>70%。
- 应用: 高敲除效率的基因敲除细胞池（KO Cell Pool），特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。KO pool能够无需繁琐的单克隆挑选过程，直接应用于多种类型的测定和分析，大幅提升实验效率。
Key words:- CCAR2 DBC1 KIAA1967
-
01. 在 37℃水浴中预热完全培养基。
02. 将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
03. 将冻存管转移到生物安全柜中，并用 70% 乙醇擦拭表面。
04. 拧开冻存管管盖，将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
05. 在室温下以 125g 离心 5-7 分钟，弃上清。
06. 用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
07. 将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
08. 参考传代比例：1/2 到 1/4 传代，2-3 天长满。 -
01. 待培养瓶中细胞汇合度至 80%-90% 以上，可进行细胞传代。
02. 将培养基、PBS、胰酶（0.25%Trypsin_EDTA Gibco 25200-056） 等从 4℃冰箱中拿出， 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。03. 从培养箱中取出待传代的培养瓶，瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
04. 为避免冲散细胞，沿培养瓶上壁 PBS 润洗细胞，清洗细胞后弃去，T25 加 2mL。
05. 加入对应体积的胰酶（T75 加 1.5mL， T25 加 0.5mL） ，并轻轻晃动瓶身使胰酶平铺满细胞 底部。可根据实际情况适当增加或减少用量。约 1-2min 后大部分细胞脱落时，加入对应体积的完全培养基终止消化，并用 5mL 移液管轻轻吹打至细胞全部脱落。
06. 将细胞悬液转移至 15mL 离心管，悬液 300g 离心 5min，弃上清。
07. 移取 5mL 完全培养基重悬细胞，按需求调整接种比例，并补充培养瓶中完全培养基，T75 加至 13-15mL，T25 加至 5mL，加 1% 双抗。
08. 盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身，使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。 -
01. 准备冻存液，并提前预冷。
02. 确保待冻存的细胞满足冻存要求，用显微镜检查以下状态：健康的外观及形态特征、所处生 长周期（对数晚期）、无污染或衰退迹象。
03. 对细胞进行消化及离心处理（具体步骤参考传代培养流程）
04. 按照每管 1mL 的量添加冻存液重悬细胞，吹打均匀后分装至冻存管。
05. 将细胞放在程序降温盒中，在 -80℃冰箱中冷冻。
06. 后续将细胞转移到液氮罐中，以便长期储存。 - 抗体验证中
Previous Page
Next Page
Classification： Gene Knockout Cell Pool（KO Pool）
Cell Line Information
Gene Symbol
CCAR2 DBC1 KIAA1967
NCBI Gene ID
57805
Ensembl ID
ENSG00000158941
Uniprot ID
Q8N163
Screening marker
N/A
Host cell/type
HGC-27/人胃癌细胞
Specifications
1×10^6 cells/ 冻存管
Growth Medium
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
growth characteristics
贴壁细胞，上皮细胞样
culture condition
37℃,5% CO2 的培养箱，1/2 到 1/4传代
doubling time
~17 hours
Reference fluid change frequency
2~3次/周
Mycoplasma test results
阴性
Knock-out validation
Knockout efficiency (Sanger sequencing)
>70%
Proteome Validation Results
N/A
Antibody number
添加中
Antibody validation results
Cell Line Description
Introduction of target gene
Core component of the DBIRD complex, a multiprotein complex that acts at the interface between core mRNP particles and RNA polymerase II (RNAPII) and integrates transcript elongation with the regulation of alternative splicing: the DBIRD complex affects local transcript elongation rates and alternative splicing of a large set of exons embedded in (A + T)-rich DNA regions (PubMed:22446626). Inhibits SIRT1 deacetylase activity leading to increasing levels of p53/TP53 acetylation and p53-mediated apoptosis (PubMed:18235501, PubMed:18235502, PubMed:23352644). Inhibits SUV39H1 methyltransferase activity (PubMed:19218236). Mediates ligand-dependent transcriptional activation by nuclear hormone receptors (PubMed:19131338). Plays a critical role in maintaining genomic stability and cellular integrity following UV-induced genotoxic stress (PubMed:23398316). Regulates the circadian expression of the core clock components NR1D1 and ARNTL/BMAL1 (PubMed:23398316). Enhances the transcriptional repressor activity of NR1D1 through stabilization of NR1D1 protein levels by preventing its ubiquitination and subsequent degradation (PubMed:23398316). Represses the ligand-dependent transcriptional activation function of ESR2 (PubMed:20074560). Acts as a regulator of PCK1 expression and gluconeogenesis by a mechanism that involves, at least in part, both NR1D1 and SIRT1 (PubMed:24415752). Negatively regulates the deacetylase activity of HDAC3 and can alter its subcellular localization (PubMed:21030595). Positively regulates the beta-catenin pathway (canonical Wnt signaling pathway) and is required for MCC-mediated repression of the beta-catenin pathway (PubMed:24824780). Represses ligand-dependent transcriptional activation function of NR1H2 and NR1H3 and inhibits the interaction of SIRT1 with NR1H3 (PubMed:25661920). Plays an important role in tumor suppression through p53/TP53 regulation; stabilizes p53/TP53 by affecting its interaction with ubiquitin ligase MDM2 (PubMed:25732823). Represses the transcriptional activator activity of BRCA1 (PubMed:20160719). Inhibits SIRT1 in a CHEK2 and PSEM3-dependent manner and inhibits the activity of CHEK2 in vitro (PubMed:25361978).
Cell development path
采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell Pool；Sanger 测序结果显示KO Cell Pool敲除效率>70%。
Application
高敲除效率的基因敲除细胞池（KO Cell Pool），特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。KO pool能够无需繁琐的单克隆挑选过程，直接应用于多种类型的测定和分析，大幅提升实验效率。
Cell Culture Instructions
Cell Resuscitation
01. 在 37℃水浴中预热完全培养基。
02. 将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
03. 将冻存管转移到生物安全柜中，并用 70% 乙醇擦拭表面。
04. 拧开冻存管管盖，将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
05. 在室温下以 125g 离心 5-7 分钟，弃上清。
06. 用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
07. 将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
08. 参考传代比例：1/2 到 1/4 传代，2-3 天长满。
cell passage
01. 待培养瓶中细胞汇合度至 80%-90% 以上，可进行细胞传代。
02. 将培养基、PBS、胰酶（0.25%Trypsin_EDTA Gibco 25200-056） 等从 4℃冰箱中拿出， 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
03. 从培养箱中取出待传代的培养瓶，瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
04. 为避免冲散细胞，沿培养瓶上壁 PBS 润洗细胞，清洗细胞后弃去，T25 加 2mL。
05. 加入对应体积的胰酶（T75 加 1.5mL， T25 加 0.5mL） ，并轻轻晃动瓶身使胰酶平铺满细胞 底部。可根据实际情况适当增加或减少用量。约 1-2min 后大部分细胞脱落时，加入对应体积的完全培养基终止消化，并用 5mL 移液管轻轻吹打至细胞全部脱落。
06. 将细胞悬液转移至 15mL 离心管，悬液 300g 离心 5min，弃上清。
07. 移取 5mL 完全培养基重悬细胞，按需求调整接种比例，并补充培养瓶中完全培养基，T75 加至 13-15mL，T25 加至 5mL，加 1% 双抗。
08. 盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身，使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。
cell cryopreservation
01. 准备冻存液，并提前预冷。
02. 确保待冻存的细胞满足冻存要求，用显微镜检查以下状态：健康的外观及形态特征、所处生 长周期（对数晚期）、无污染或衰退迹象。
03. 对细胞进行消化及离心处理（具体步骤参考传代培养流程）
04. 按照每管 1mL 的量添加冻存液重悬细胞，吹打均匀后分装至冻存管。
05. 将细胞放在程序降温盒中，在 -80℃冰箱中冷冻。
06. 后续将细胞转移到液氮罐中，以便长期储存。
Related Products
Copyright © Elem Biotechnology (Wuhan) Co., Ltd.
LM